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儀器型號:析譜TU-1810紫外可見分光光度計
選擇模式: 主界面中按【5】直接進入“DNA/蛋白質(zhì)測量
分光光度計(尤其是紫外-可見分光光度計)是檢測和定量溶液中純化DNA的最常用、最快速的方法之一。其原理基于DNA分子對特定波長紫外光的吸收特性。
以下是分光光度計檢測DNA的原理和步驟詳解:
核酸的堿基結(jié)構(gòu): DNA(和RNA)分子中的嘌呤堿基(腺嘌呤A、鳥嘌呤G)和嘧啶堿基(胞嘧啶C、胸腺嘧啶T)具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu)。
最大吸收峰: 這些共軛雙鍵結(jié)構(gòu)使得核酸在260納米 (nm) 附近的紫外光區(qū)域有一個特征性的最大吸收峰。
比爾-朗伯定律: 分光光度計遵循比爾-朗伯定律:溶液中物質(zhì)對特定波長光的吸光度 (A) 與其濃度 (c) 和光程長度 (l) 成正比。公式表示為:A = ε * c * l
A: 吸光度 (Absorbance, 無單位)
ε: 摩爾吸光系數(shù) (或消光系數(shù), L mol?1 cm?1),是物質(zhì)在特定波長下的吸光特性常數(shù)。
c: 物質(zhì)的摩爾濃度 (mol L?1)
l: 光通過溶液的光程長度 (cm)
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